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做骨分化的经典小鼠前成骨细胞 MC3T3-E1,怎么养出好状态

做骨分化的经典小鼠前成骨细胞 MC3T3-E1,怎么养出好状态 搞骨组织工程、骨质疏松或者成骨分化的同学MC3T3-E1 基本是绕不开的一株。它是小鼠颅顶来源的前成骨细胞最大的价值是能在体外分化成骨、形成钙化组织是研究骨形成的标准模型。MC3T3-E1 是小鼠颅顶前骨细胞从 C57BL/6 小鼠颅骨建立基于高碱性磷酸酶ALP活性筛选而来。它能分化成成骨细胞和骨细胞体外可形成钙化骨组织矿物沉积鉴定为羟基磷灰石分泌胶原表达白血病抑制因子mLIF。主要用于成骨分化、骨代谢研究。细胞背景与来源来源小鼠C57BL/6颅顶骨。贴壁生长成纤维样/上皮样低密度时形态较伸展长满后呈铺路石样。应用场景与研究价值骨生物学成骨细胞分化、矿化羟基磷灰石沉积研究。骨代谢/疾病骨质疏松、骨再生、生长因子TGF-β、bFGF、PGF2α调控研究。培养特性与注意事项培养基EMEMMEM NEAA 10% FBS 1% 双抗。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。贴壁、长得快要保证培养基量充足长到 80% 及时传代一般 1:2-1:3周期 2-3 天。传代PBS 润洗后胰酶消化消化到部分细胞脱落再终止900 rpm 离心 3-5 min重悬后细胞应分散成单个。换液 2-3 天一次。冻存程序性冻存液程序降温盒 -80℃ 过夜转液氮。复苏37℃ 水浴至米粒冰块150g 离心 1-2 min。生物安全BSL-1。注意消化不到位会影响后续生长宁可多观察几次也别硬扯做分化实验时注意细胞代数代数太老分化能力会下降。MC3T3-E1 消化这步最容易翻车体系统一会省心很多。尚恩生物SUNNCELL有 MC3T3-E1 现货货号 SNL-518配套专用培养基细胞过 STR 鉴定技术支持也能帮你看消化状态。
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